NCIS是一支隸屬于五角大樓特別部門的特工小組，負責調查所有與海軍及海軍陸戰隊人員相關的犯罪案件。由經驗豐富的特工Leroy Jethro Gibbs（Mark Harmon飾）領導的這支隊伍，以打破常規的方式追查從謀殺、間諜活動到恐怖襲擊等各類案件。Gibbs的得力助手Anthony DiNozzo（Michael Weatherly飾）憑借前重案組探員的經驗提供精準調查支持，團隊成員包括堅毅的前特勤處特工Kate Todd（Sasha Alexander飾）、技術專家Abby Sciuto（Pauley Perrette飾）以及麻省理工學院畢業生Timothy McGee（Sean Murray飾）。法醫Donald "Ducky" Mallard（David McCallum飾）則通過專業分析為案件提供關鍵證據。該小組的調查范圍涵蓋全球，其獨立于海軍指揮系統的特殊權限使其能夠直面任何級別的涉案人員。