琵姆是高速公路收費站夜班收費員，凌晨三點當值時遭遇邪惡力量威脅生命。繪畫修復者譚在夜店邂逅神秘性感女子娜潘并隨其至家中，試圖揭開她的真實身份。電視購物導演山姆的劇組成員策劃捉弄報復，在凌晨三點被告知他車禍身亡后陷入集體恐慌，燈光驟滅時惡作劇演變為詭異事件。三個時空交錯的故事通過午夜驚魂時刻串聯，各自角色在直面恐懼過程中逐步揭示超自然真相——琵姆發現收費站死亡公路的靈異淵源，譚陷入人鬼禁忌之戀引發生死糾纏，劇組成員則在捉弄導演的游戲中觸發真實靈異現象。所有角色最終都未能逃脫凌晨三點這個被詛咒的時間節點，各自悲劇在平行時空中形成命運閉環。