根據古老傳說，雨林中的虎人與鹿人部落因黑虎挑起戰爭導致仇恨延續至現代。作為韓國《RunningMan》綜藝改編的中國版節目，《奔跑吧兄弟》在創下超高收視率后，召集王寶強、楊穎、李晨等七位固定成員重返三亞拍攝。節目組在熱帶雨林場景中設置機關重重的任務挑戰，卻暗藏致命危機——跑男團內部潛伏的背叛者受古代怨念蠱惑，企圖利用節目錄制契機破壞所有成員的信任紐帶。眾人在完成奪寶任務、破解謎題的過程中接連遭遇陷阱襲擊，被迫直面彼此猜忌與生死考驗。隨著關鍵道具"孔雀之淚"的現世，背叛者身份最終被揭曉，成員們在絕境中重建團隊羈絆，成功阻止了延續千年的詛咒對現實世界的侵蝕。