2012年，人類被未知病毒感染后紐約淪為死城。Robert Neville（威爾·史密斯飾）作為免疫的軍方科學家成為唯一幸存者，白天帶著愛犬Sam在廢墟中搜尋物資并研究病毒抗體，夜間則蜷縮在布滿燈光的實驗室躲避變異成"夜魔"的感染者。當Sam因意外感染死亡后，Robert陷入絕望邊緣，準備與夜魔同歸于盡時被神秘女子Anna（艾莉絲·布拉加飾）所救。Anna堅信科羅拉多山區的隔離區仍有未被感染的人類，但Robert執著于在紐約繼續研究。最終夜魔群攻破實驗室的決戰夜，Robert已完成抗體研發，卻必須在黎明前守住最后防線——因為只有讓樣本存活到天亮，人類文明才可能延續。他用生命掩護Anna和另一幸存者攜樣本撤離，以自我犧牲為人類留下最后希望。